(1)索式提取法
原理: 樣品經(jīng)前處理后,放入圓筒濾紙內(nèi),將濾紙筒置于索式提取管中,利用乙醚或石油醚在水浴中加熱回流,使樣品中的脂肪進(jìn)入溶劑中,回收溶劑后所得到的殘留物,即為脂肪(粗脂肪)。
采用這種方法測出游離態(tài)脂,此外還含有磷脂、色素、蠟狀物、揮發(fā)油、糖脂等物質(zhì),所以用索氏提取法測得的脂肪為粗脂肪。
索氏提取法適用于脂類含量較高,結(jié)合態(tài)的脂類含量較少,能烘干磨細(xì),不宜吸濕結(jié)塊的樣品的測定。
此法只能測定游離態(tài)脂肪,而結(jié)合態(tài)脂肪無法測出,要想測出結(jié)合態(tài)脂肪需在一定條件下水解后變成為游離態(tài)的脂肪方能測出。
另外此法是經(jīng)典方法,對大多數(shù)樣品結(jié)果比較可靠,但需要周期長,溶劑量大。(2)巴布科克氏法
巴布科克氏法和蓋勃氏法的原理相似,蓋勃氏法較巴布科克法簡單快速,多用一種試劑異戊醇。使用異戊醇是為了防止糖炭化。該法在歐洲比在美國使用更為廣泛。
(3)蓋勒氏法
原理: 用濃硫酸溶解乳中的乳糖和蛋白質(zhì)等非脂成分,將牛奶中的酪蛋白鈣鹽轉(zhuǎn)變成可溶性的重硫酸酪蛋白,使脂肪球膜被破壞,脂肪游離出來,再利用加熱離心,使脂肪完全迅速分離,直接讀取脂肪層的數(shù)值,便可知被測乳的含脂率。
適應(yīng)范圍與特點(diǎn):這兩種方法都是測定乳脂肪的標(biāo)準(zhǔn)方法,適用于鮮乳及乳制品脂肪的測定。對含糖多的乳品(如甜煉乳、加糖乳粉等),采用此方法時(shí)糖易焦化,使結(jié)果誤差較大,故不適宜。此法操作簡便,迅速。對大多數(shù)樣品來說測定精度可滿足要求。
(4)羅斯-哥特里法
巴布科克氏法、蓋勃式法、羅斯-哥特里法主要用于乳、及乳制品中脂類的測定
(5)酸水解法
酸水解法測出的脂肪為游離態(tài)脂和結(jié)合脂全部脂類。
原理: 將試樣與鹽酸溶液一同加熱進(jìn)行水解,使結(jié)合或包藏在組織里的脂肪游離出來,再用乙醚和石油醚提取脂肪,回收溶劑,干燥后稱量,提取物的重量即為脂肪含量。
適用范圍與特點(diǎn)
適用于各類食品中脂肪的測定,對固體、半固體、粘稠液體或液體食品,特別是加工后的混合食品,容易吸濕、結(jié)塊,不易烘干的食品,不能采用索氏提取法時(shí)。用此法效果較好。
利用氨-乙醇溶液破壞乳的膠體性狀及脂肪球膜, 使非脂肪成分溶解于氨-乙醇溶液中,而脂肪游離出來,再用乙醚 石油醚提取出脂肪,蒸餾去除溶劑后,殘留物即為乳脂肪。
本法適用于各種液狀乳,各種煉乳、乳粉、乳油及冰淇淋等能 在堿性溶液中溶解的乳制品,也適用于豆乳或加水呈乳狀的食品。 本法為國際標(biāo)準(zhǔn)化組織,聯(lián)合國糧農(nóng)組織/世界衛(wèi)生組織等采用, 為乳及乳制品脂類定量的國際標(biāo)準(zhǔn)法。
試劑:25%氨水(相對密度0。91) ;96%乙醇;乙醚;石油醚。
儀器:抽脂瓶:內(nèi)徑2。 0?2。
5 cm、容積100 mL。 操作方法:取一定量樣品于抽脂瓶中,加入1。
25 mL氨水,充分混勻,置60°C水浴中加熱5 min,再振搖2 min,加入10 mL乙 醇,充分搖勻,于冷水中冷卻后,加入25 mL乙醚,振搖30 s,加入 25 mL石油醚,再搖30 S,靜置30 min,待上層液澄清時(shí),讀取醚層 體積,放出一定體積醚層于一已恒重的燒瓶中,蒸餾回收乙醚和石 油醚,揮干殘余醚后,加人100?105°C烘箱中干燥1。 5 h,取出放 人干燥器中冷卻至室溫后稱重,重復(fù)操作直至恒重。
計(jì)算: 脂肪百分含量= 7%X100% mX Vi/V 式中:m2為燒瓶中脂肪質(zhì)量,g; wi為燒瓶質(zhì)量,g; m為樣品質(zhì)量,g; V為讀取醚層總體積,mL; W為放出醚層體積,mL。
測定身體內(nèi)脂肪重量的方法很多,現(xiàn)在簡單地介紹幾種。
1、重水法 用重水法可以測出被測人全身的含水量。已知人體除脂肪部分(LBM)的含水率是72%,由全身的含水量和LBM的含水率就可以計(jì)算出被測人的除脂肪重量,進(jìn)而求出身體內(nèi)的脂肪重量。
2、放射性同位素40K法 人體除脂肪部分(LBM)中天然鉀(K)的含量是一定的。天然鉀(K)由穩(wěn)定性同位素39K和41K及放射性同位素40K組成。天然鉀(K)中放射性同位素40K的百分含量也是一定的。一克天然鉀(K)中的放射性同位素40K每分鐘發(fā)生二十八次?-衰變。用全身記數(shù)器測定被測人體內(nèi)每分鐘發(fā)生?-衰變時(shí)放出的?粒子數(shù),就可以計(jì)算出被測人的除脂肪體重。然后,求出身體內(nèi)的脂肪重量。
以上兩種方法測量身體的脂肪重量時(shí),都需要相當(dāng)復(fù)雜而精密的儀器。
3、水中測量法 水中測量是一種比較精確而又比較簡單的方法。就是使被測的人的身體浸在水中,測量身體在水中的浮力,然后,算出被測人的體積。假定人體脂肪的比重是0.9千克/立方分米。身體的除脂肪部分(LBA)的比重是1.095千克/立方分米,就可以算出身體內(nèi)除脂肪部分的重量和脂肪的重量。
水中測量法的具體做法是:做一個(gè)具有管狀框架的椅子,將這樣的椅子掛在大稱的稱鉤上。被測者坐在椅子上,使管狀框架的椅子和被測人的身體全部浸在水中。人體內(nèi)骨骼和肌肉的重量越大,被測人的身體就越往下沉,在水里的體重越重。人體內(nèi)的脂肪越多,越有向上浮的傾向,在水中的重量越輕。
4、測量皮膚褶厚度的方法 測量皮膚褶的厚度可以粗略地推算出身體脂肪的百分?jǐn)?shù)。皮膚褶厚度可以反映皮下脂肪的含量,但不能反映隱藏在肌肉里的脂肪。這種方法比較簡單。
測量皮膚褶方法如下: 用拇指和食指捏起皮膚,不要把肌肉包括在內(nèi)。用測量儀器或卡尺(也可用普通尺子)測量雙折皮膚的厚度,以間接算出身體脂肪的百分?jǐn)?shù)。
測量皮膚褶的部位在肩胛骨下角處、腹部、上臂外側(cè)三角肌等三個(gè)部位。肩胛骨下角處在背部左肩下和右肩下。測量腹部皮膚褶時(shí),要提捏上腹左前方和右前方的皮膚褶。測量出這三個(gè)部位的皮膚褶厚度以后,參考身體脂肪百分?jǐn)?shù)推算表,就可以推算出自己的身體脂肪百分?jǐn)?shù)。
在正常情況下,身體脂肪隨年齡增長而增加,從20歲到60歲之間,每增長10歲,脂肪百分?jǐn)?shù)增加百分之一。健康女子的身體脂肪率以22%為限,男子以15%為限,優(yōu)秀運(yùn)動員則更低呢。
如下: ① 乳及乳制品中測定脂肪含量的標(biāo)準(zhǔn)方法有巴布科克法、蓋 勃法和羅紫哥特里法,但前兩種方法對于含糖多的乳品易使糖焦 化,結(jié)果誤差較大。
② 乳類脂肪雖然也屬游離脂肪,但因脂肪球被乳中酪蛋白鈣 鹽包裹,又處于高度分散的膠體分散系中,故不能直接被乙醚、石 油醚提取,需預(yù)先用氨水處理,故此法也稱為堿性乙醚提取法。 ③ 若無抽脂瓶時(shí),可用容積100 mL的具塞量筒替用,待分層 后讀數(shù),用移液管吸出一定量醚層。
④ 加氨水后,要充分混勻,否則會影響下步醚對脂肪的提取。 ⑤ 操作時(shí)加人乙醇的作用是沉淀蛋白質(zhì)以防止乳化,并溶解 醇溶性物質(zhì),使其留在水中避免進(jìn)人醚層,影響結(jié)果。
⑥ 加入石油醚的作用是降低乙醚極性,使乙醚與水不混溶,只 抽提出脂肪,并可使分層清晰。 ⑦ 對已結(jié)塊的乳粉,用本法測定脂肪,其結(jié)果往往偏低。
一. 脂肪夾
在身體特定部位用手指揑起皮下脂肪,再用脂肪夾量度厚度,然后利用公式估算出體脂率。
優(yōu)點(diǎn):較準(zhǔn)確、價(jià)錢低、度量結(jié)果穩(wěn)定
缺點(diǎn):需要有良好技巧才可準(zhǔn)確量度,不適合過胖的人士,因皮下脂肪太厚,有機(jī)會降低準(zhǔn)確度。
二. 生物電流阻力分析
即是俗稱的脂肪磅,透過身體不同成份如水、肌肉、脂肪的電阻,估計(jì)身體的脂肪量。較準(zhǔn)確的脂肪磅如健身室的InBody會從手掌及腳掌釋放微電流流經(jīng)全身,只靠腳掌的脂肪磅相對不太準(zhǔn)確。
優(yōu)點(diǎn):容易操作、省時(shí)間、價(jià)錢相對較平
缺點(diǎn):會受身體水份多少而影響測量結(jié)果,同一天早上和晚上的結(jié)果都可以有很大出入,測量結(jié)果只能作參考。
三. 圍度測量
透過量度身體不同部位的圓周,推算出身體脂肪比率。男士需要量度身高、頸圍及腰圍;女士則要量度身高、頸圍、腰圍及臀圍。有興趣試試的朋友可到這個(gè)網(wǎng)站計(jì)算結(jié)果。
優(yōu)點(diǎn):容易度量、價(jià)錢平、省時(shí)間
缺點(diǎn):準(zhǔn)確度成疑,因?yàn)榉侵苯訙y量脂肪量,測量結(jié)果只能作參考。
四. 水底稱量法
在實(shí)驗(yàn)室利用特制器材,以「阿基米德定理」先計(jì)算人體密度,然后再利用公式計(jì)算出脂肪比例。
優(yōu)點(diǎn):非常準(zhǔn)確
缺點(diǎn):價(jià)格高昂、不普及、花費(fèi)時(shí)間及功序長。
五. 雙能量X射線吸收測量法(DEXA)
一種以增強(qiáng)式X光的方法測量肌肉及脂肪量。
優(yōu)點(diǎn):非常準(zhǔn)確
缺點(diǎn):價(jià)格高昂、不普及、花費(fèi)時(shí)間及功序長
六. 目測
透過檢視自己體形,對照圖片去估計(jì)身體脂肪比率。
優(yōu)點(diǎn):容易度量、免費(fèi)、省時(shí)間
缺點(diǎn):不準(zhǔn)確
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