嘔吐毒素免疫親和柱主要適用于谷物、飼料復(fù)等樣本中的DON凈化處理,提高了樣品的純度,純化后的提取液可用不同的分析方法測(cè)定。
適合于和HPLC、LC-MS及DON酶免分析試劑盒結(jié)合使用,定量檢測(cè)DON。當(dāng)然在使用過程中也制有一些問題需要注意!嘔吐毒素免疫親和柱注意事項(xiàng):(1)嘔吐毒素對(duì)人體有害,應(yīng)戴手套操作。
2113凡接觸到標(biāo)樣的玻璃器皿都要用5%次氯酸鈉浸泡過夜。(2)不要使用過有效期的免疫親和柱。
(3)免疫親和柱應(yīng)在2~8℃保存。不要冷凍。
(4)使用前,免疫親和柱需至少提前半小時(shí)回溫至室溫(25℃左右)。5261(5)HPLC液相測(cè)定值、4102試劑盒計(jì)算值接近最高檢出值時(shí)1653,樣本的實(shí)際含量可能大于柱容量而造成流穿,建議減少上樣體積重新過柱。
(6)稱取的樣品量以及提取液的體積可根據(jù)實(shí)際情況按比例調(diào)整,建議最低不少于10g樣。如果您想要了解更多關(guān)于嘔吐毒素免疫親和柱的相關(guān)信息,可查看網(wǎng)頁鏈接,了解更多詳細(xì)內(nèi)容。
原發(fā)布者:大元帥VS大法官
親和層析一、原理親和層析是利用生物大分子所具有的專一親和力而設(shè)計(jì)的純化技術(shù)尋找配基配基固定化制成親和層析柱基本過程?固相化+吸附++洗脫解吸+載體樣品固相化再生常見具有專一性親和力的生物分子對(duì):酶:抗體:細(xì)胞:核酸:激素或藥物:外源凝集素:基質(zhì)類似物,抑制劑,輔酶抗原,病毒,細(xì)胞細(xì)胞表面特異蛋白,外源凝集素互補(bǔ)堿基序列,組蛋白,核酸聚合酶受體,載體蛋白多糖,糖蛋白,細(xì)胞表面受體,細(xì)胞(一)載體的選擇1、載體要求:(1)不溶性(2)滲透性:疏松網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),有良好的液體流動(dòng)性(3)化學(xué)和機(jī)械性能穩(wěn)定(4)具備大量能被活化的基因(5)抗微生物和酶的侵蝕2、常用載體(1)纖維素特點(diǎn):價(jià)廉、來源充足纖維性、非均一性限制大分子的摻入非專一性吸附嚴(yán)重用于抗體和酶的純化(2)葡聚糖凝膠特點(diǎn):化學(xué)及物理性質(zhì)穩(wěn)定多孔性比瓊脂糖低(3)瓊脂糖凝膠濃度商品2%Sepharose2B4%Sepharose4B6%Sepharose6B凝膠濃度越低結(jié)構(gòu)越疏松機(jī)械強(qiáng)度越低(4)聚丙烯酰胺凝膠特點(diǎn):物理化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定抗微生物侵蝕能力比瓊脂糖強(qiáng)可供化學(xué)反應(yīng)的酰胺基較多(5)多孔玻璃特點(diǎn):不受微生物的侵蝕耐酸、堿、有機(jī)溶劑表面非專一性吸附(二)配基的選擇1、對(duì)于欲純化的物質(zhì)應(yīng)有專一親和力2、必須具備能被修飾的功能基團(tuán)以酶和底物為例:KLKL:
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