一、鈉、鉀的測定 (一)標(biāo)本要求 血漿或全血鉀比血清低0.2~0.5mmol/L,是因為血液凝固時血小板破裂釋放出一部分K+。
因此,報告時必須注明是血清還是血漿。 測血鉀時,無論是血清還是血漿標(biāo)本一定不能溶血,輕微溶血(500mgHb/L)就可引起血鉀升高3%。
維持細胞內(nèi)外鉀平衡是依靠細胞膜上的Na+-K+ATP酶,如果分析前全血標(biāo)本被冷藏過,糖酵解被抑制,Na+-K+ATP酶不能維持內(nèi)外平衡,而造成細胞內(nèi)鉀外移,使測定結(jié)果增高。在25℃存放1.5小時,血清鉀會增高0.2mmol/L,4℃存放5小時會增高2 mmol/L。
相反,也會因為標(biāo)本分離前被儲存在37℃,由于糖酵解增強,使血鉀進入到細胞內(nèi)而血鉀降低。如果白細胞數(shù)量增加,即便在室溫放置也會引起血鉀降低。
血鈉測定標(biāo)本可以在2~4℃或冰凍存放,紅細胞中僅含血漿中的1/10,即便是溶血也不會造成多大影響。 脂血標(biāo)本可高速離心分離后用離子選擇電極方法檢測。
(二)測定方法 1.火焰光度法 火焰光度法(FES)是一種發(fā)射光譜分析法,具有精密度高、特異性好以及成本低廉等特點,被為血清(漿)鈉、鉀測定的參考方法。 2. 離子選擇電極法 離子選擇電極法(ISE)儀器上裝有含玻璃膜的鈉電極和含液態(tài)離子交換膜(滲有纈氨霉素)的鉀電極。
ISE檢測原理是檢測電極表面電位的改變,比較測定電極與參比電極表面電位變化的差值大小來估計樣本中含量。 3. 分光光度法 分光光度法分為兩類:一類是酶法,另一類是Na+、K+被結(jié)合到一類大環(huán)發(fā)色團時發(fā)生光譜的改變。
(1)酶法:Na+測定的酶法原理是在Na+離子存在下β-半乳糖苷酶水解鄰-硝基酚-β-D-半乳吡喃糖苷(o-Nitrophenyl-β-D-galactopyranoside,ONPG),在420nm波長可測定產(chǎn)物鄰-硝基酚(發(fā)色團)顏色產(chǎn)生的速率。 K+測定酶法例子是利用色氨酸酶,一定量的K+會增強酶的活性,用測定該反應(yīng)酶活性的改變來判斷K+濃度。
酶法的精密度和準確度可以與火焰光度法比較,但膽紅素及溶血有一些影響,脂血標(biāo)本因影響大而不能測定。 (2)大環(huán)發(fā)色團法 二、氯的測定 臨床常用氯的檢測方法有:汞滴定法、分光光度法、庫侖電量分析法及最常用的ISE法。
(一)標(biāo)本要求 氯測定可用血清、血漿、尿液、汗液等樣本,Cl-在血清、血漿中相當(dāng)穩(wěn)定,肉眼可見的溶血不會造成有意義的干擾,因為紅細胞中Cl-的濃度只是血清或血漿中的一半。 (二)方法學(xué)評價 1. 汞滴定法 2. 2. 分光光度法 3. 3. 庫侖電量分析法 4. 4. 離子選擇電極法 離子選擇電極法(ISE)法是目前測定Cl-最好的方法,因為Cl-電極總是與Na+、K+電極配套使用,僅需要50μl~100μl血清、血漿或全血就可測出Na+、K+ 、Cl-的含量。
簡便、快速、準確,是臨床使用最多的方法。
1、向溶液中滴入硝酸酸化過的硝酸銀溶液,有白色沉淀(氯化銀沉淀)產(chǎn)生,證明有Cl-。
2、用鉑絲蘸取少量溶液,置于酒精燈上灼燒,火焰呈黃色,可證含有Na+。
3、為了消除干擾,可取原試液加飽和氫氧化鋇至呈明顯堿性,引入試液中的 Ba2+ 應(yīng)繼以碳酸銨除之,最后用灼燒法除去銨鹽。殘渣用水加熱浸取后,按1:8的滴數(shù)加乙酸鈾酰鋅試劑,并用玻璃棒摩擦管壁,如有檸檬黃色結(jié)晶形沉淀生成,證明有Na+存在。
4、可以取樣分兩份,向其中的一份中加入AgNO3,有白色沉淀生成;用潔凈鐵絲蘸取另一份溶液,然后在酒精燈上灼燒,火焰呈黃色,證明溶液中含NaCl。
5、取樣品細粉5.0g,置瓷蒸發(fā)皿內(nèi),滴加新配制的淀粉混合液(取可溶性淀粉0.25g,加水2ml,攪勻,再加沸水至25ml,隨加隨攪拌,放冷,加0.025mol/L硫酸溶液2ml、亞硝酸鈉試液3滴與水25ml,混勻)適量使晶粉濕潤,置日光燈下觀察,5分鐘內(nèi)晶粒不得顯藍色痕跡,則為NaCl。
參考資料
百度百科-氯化鈉
苯甲酸鈉的檢驗
溶液的澄清度與顏色 取本品1.0g,加水10ml使溶解,溶液應(yīng)澄清無色.
氯化物法
取本品0.50g,置30ml瓷坩堝中,加硝酸溶液(1→10)2ml,混勻,于100oC干燥至無明顯濕跡,加碳酸鈣0.8g,用少量水潤濕,在100oC干燥后,于電爐上低溫炭化,再在600oC馬福爐中灼燒10分鐘,冷卻后,用硝酸溶液20ml溶解殘渣,濾過,濾液置50ml比色管中,用水15ml洗滌瓷坩堝,洗液并入濾液中,加水至刻度,搖勻,作為供試品溶液.另取碳酸鈣0.8g,加硝酸溶液22.5ml溶解,濾過,濾液置50ml比色管中,加15.0ml標(biāo)準氯化鈉溶液,用水稀釋至刻度,搖勻,作為對照溶液.在兩溶液中各加硝酸銀試液0.5ml,搖勻,避光放置5分鐘后比較,供試品溶液的濁度應(yīng)淺于對照溶液的濁度(0.03%).
硫酸鹽法
取本品0.40g,用水40ml溶解,邊攪拌邊慢慢加入稀鹽酸4ml,靜置5分鐘,濾過.取續(xù)濾液20ml置50ml納氏比色管中,加水至刻度,搖勻,作為供試品溶液;量取標(biāo)準硫酸鉀溶液2.4ml,置50ml納氏比色管中,加稀鹽酸2ml,加水至刻度,搖勻,作為對照溶液.在兩溶液中各加氯化鋇溶液5ml,搖勻,供試品溶液的濁度應(yīng)淺于對照溶液的濁度(0.12%).
鄰苯二甲酸法
取本品0.1g,加水1ml和間苯二酚硫酸溶液[取間苯二酚0.1g溶于稀硫酸(1→10)10ml中]1ml,于120~125oC加熱蒸去水分,繼續(xù)加熱90分鐘,放冷,殘渣用水5ml溶解.量取1ml,加入氫氧化鈉溶液(43→500)10ml,搖勻,在紫外光燈(366nm)下檢視.另取鄰苯二甲酸氫鉀61mg,精密稱定,置1000ml量瓶中,用水溶解并稀釋至刻度,搖勻,精密量取1ml和間苯二酚硫酸溶液1ml,同法處理,供試品溶液的熒光強度應(yīng)弱于對照溶液.
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