須依靠流行病學(xué)史、典型臨床表現(xiàn)和實驗室檢查。
注意當(dāng)?shù)赜袩o病毒性疾病流行、接觸史及預(yù)防接種史等。病毒性感染可由多種病毒引起,但臨床表現(xiàn)均有畏寒、發(fā)熱、全身倦怠無力、食欲減退等全身中毒癥狀及受侵組織器官炎癥的表現(xiàn)。
受侵組織器官不同而可引起不同癥狀。 此外,還須注意一些有診斷意義的特殊體征,如麻疹患者的麻疹黏膜斑(科普利克氏斑)、狂犬病患者的恐水征等。
常規(guī)實驗檢查,末梢血白細(xì)胞一般均降低,淋巴細(xì)胞增多。同時多數(shù)病毒性疾病均為自限性,即病程1~2周后可不治自愈。
根據(jù)以上特點可以作出初步診斷。 確診須依靠病毒分離和血清學(xué)檢查。
病毒分離可用組織培養(yǎng)、雞胚和動物接種。應(yīng)用電鏡、免疫電鏡、免疫熒光法、酶聯(lián)免疫法及放射免疫法等可直接檢查標(biāo)本中的病毒顆粒及病毒抗原,常用作快速和早期診斷,如糞便中的甲肝病毒和輪狀病毒的顆??捎秒婄R和免疫電鏡檢出。
血清學(xué)檢查可用免疫擴散法、補體結(jié)合試驗、血凝法(間接血凝法和反向被動血凝法)、免疫熒光法、酶聯(lián)免疫法及放射免疫法等測定血清和體液中的特異性抗體。檢測抗原有助于早期診斷。
檢測抗體,一般須檢測急性期和恢復(fù)期雙份血清,恢復(fù)期血清抗體滴度較急性期血清升高4倍以上才有診斷意義。 檢測特異性IgM抗體有助于早期和現(xiàn)癥患者的診斷。
近年來,應(yīng)用分子雜交技術(shù)和聚丙烯酰胺凝膠電泳法診斷病毒性疾病,不僅有很高的敏感性和特異性,而且可以診斷不同型和株的病毒感染。此外,應(yīng)用單克隆抗體檢測病毒抗原,也大大提高了診斷病毒性疾病的敏感性和特異性,而且用作對病毒抗原結(jié)構(gòu)的研究。
寨卡病毒病的檢測方法包括病毒核酸檢測、IgM抗體檢測、中和抗體檢測和病毒分離等。寨卡病毒與黃病毒屬其他病毒具有較強的血清學(xué)交叉反應(yīng),目前主要采用病毒核酸檢測。
開展蚊媒寨卡病毒檢測時,對捕獲的伊蚊成蚊或幼蟲進行病毒核酸檢測。
開展寨卡病毒實驗室檢測時,應(yīng)同時考慮登革病毒和基孔肯雅病毒感染可能。登革病毒和基孔肯雅病毒實驗室檢測應(yīng)按照相應(yīng)的技術(shù)指南開展。
(一)臨床標(biāo)本檢測。
1.病原學(xué)檢測
病原學(xué)檢測主要適用于急性期血液標(biāo)本,一般認(rèn)為發(fā)病7天內(nèi)檢測陽性率高。
(1)核酸檢測:采用熒光定量RT-PCR方法,是目前早期診斷寨卡病毒病的主要檢測手段。
(2)病毒分離:將標(biāo)本接種于蚊源細(xì)胞(C6/36)或哺乳動物細(xì)胞(BHK21、Vero)進行分離培養(yǎng),出現(xiàn)病變以后,用檢測核酸的方法鑒定病毒。也可使用乳鼠腦內(nèi)接種進行病毒分離。
2.血清學(xué)檢測
(1)血清特異性IgM抗體:發(fā)病3天后可檢出病毒特異性IgM抗體,但發(fā)病7天后檢出率高??刹捎肊LISA、免疫熒光等方法檢測。IgM抗體陽性,提示患者可能新近感染寨卡病毒,但寨卡病毒IgM抗體與登革病毒、黃熱病毒和西尼羅病毒等黃病毒有較強的交叉反應(yīng),易于產(chǎn)生假陽性。
(2)中和抗體:采用空斑減少中和試驗方法檢測?;颊呋謴?fù)期血清中和抗體陽轉(zhuǎn)或滴度較急性期呈4倍及以上升高,且排除登革、乙腦等其他常見黃病毒感染,可以確診。
(二)媒介標(biāo)本檢測。
1.標(biāo)本處理
將分類后的伊蚊成蚊或幼蟲,按照采集地點,每10~20只為一份進行研磨處理。
2.病毒核酸檢測
用RT-PCR的方法進行寨卡病毒核酸檢測
3.病毒分離
病毒核酸陽性的標(biāo)本進行病毒分離。
病毒感染的實驗室檢查包括病毒分離與鑒定、病毒核酸與抗原的直接檢出以及特異性抗體的檢測。
臨床醫(yī)師根據(jù)流行病學(xué)資料,疾病的癥狀與體征綜合判斷可能為何種病毒感染,留取適宜的標(biāo)本送檢。 一、檢材的采集與送檢 病毒性疾病通常采集血液、鼻咽分泌液、咯痰、糞便、腦脊液、皰疹內(nèi)容物、活檢組織或尸檢組織等。
供分離病毒、檢出核酸及抗原的標(biāo)本的,要求: (一)盡早采取 在發(fā)病初期(急性期)采取,較易檢出病毒,越遲陽性率越低。 (二)部位適宜 由感染部位采取,如呼吸道感染采取鼻咽洗漱液或咯痰;腸道感染采取糞便;腦內(nèi)感染采取腦脊液;皮膚感染采取病灶組織;有病毒血癥時采取血液。
(三)冷藏速送 病毒離活體后在室溫下很易死亡,故采得檢材應(yīng)盡快送檢。若距離實驗室較遠(yuǎn),應(yīng)將檢材放入裝有冰塊或干冰的空器內(nèi)送檢。
病變組織則應(yīng)保存于50%的甘油緩沖鹽水中。污染檢材,如鼻咽分泌液、糞便等應(yīng)加入青霉素、鏈霉素或慶大毒素等,以免雜菌污染細(xì)胞或雞胚,而影響病毒分離。
檢測特異性抗體需要采取急性期與恢復(fù)期雙份血清,第一份盡可能在發(fā)病后立即采取,第二份在發(fā)病后2~3周采取。血清標(biāo)本放4℃-20℃保存,試驗前血清標(biāo)本以56℃30分鐘處理去除非特異性物質(zhì)及補體。
無菌性腦炎患者也可取腦脊液檢測特異性lgM。 有用的話,給個好評吧O(∩_∩)O~~。
寨卡病毒病的檢測方法包括病毒核酸檢測、IgM抗體檢測、中和抗體檢測和病毒分離等。
寨卡病毒與黃病毒屬其他病毒具有較強的血清學(xué)交叉反應(yīng),目前主要采用病毒核酸檢測。開展蚊媒寨卡病毒檢測時,對捕獲的伊蚊成蚊或幼蟲進行病毒核酸檢測。
開展寨卡病毒實驗室檢測時,應(yīng)同時考慮登革病毒和基孔肯雅病毒感染可能。登革病毒和基孔肯雅病毒實驗室檢測應(yīng)按照相應(yīng)的技術(shù)指南開展。
(一)臨床標(biāo)本檢測。1.病原學(xué)檢測病原學(xué)檢測主要適用于急性期血液標(biāo)本,一般認(rèn)為發(fā)病7天內(nèi)檢測陽性率高。
(1)核酸檢測:采用熒光定量RT-PCR方法,是目前早期診斷寨卡病毒病的主要檢測手段。(2)病毒分離:將標(biāo)本接種于蚊源細(xì)胞(C6/36)或哺乳動物細(xì)胞(BHK21、Vero)進行分離培養(yǎng),出現(xiàn)病變以后,用檢測核酸的方法鑒定病毒。
也可使用乳鼠腦內(nèi)接種進行病毒分離。2.血清學(xué)檢測(1)血清特異性IgM抗體:發(fā)病3天后可檢出病毒特異性IgM抗體,但發(fā)病7天后檢出率高。
可采用ELISA、免疫熒光等方法檢測。IgM抗體陽性,提示患者可能新近感染寨卡病毒,但寨卡病毒IgM抗體與登革病毒、黃熱病毒和西尼羅病毒等黃病毒有較強的交叉反應(yīng),易于產(chǎn)生假陽性。
(2)中和抗體:采用空斑減少中和試驗方法檢測?;颊呋謴?fù)期血清中和抗體陽轉(zhuǎn)或滴度較急性期呈4倍及以上升高,且排除登革、乙腦等其他常見黃病毒感染,可以確診。
(二)媒介標(biāo)本檢測。1.標(biāo)本處理將分類后的伊蚊成蚊或幼蟲,按照采集地點,每10~20只為一份進行研磨處理。
2.病毒核酸檢測用RT-PCR的方法進行寨卡病毒核酸檢測3.病毒分離病毒核酸陽性的標(biāo)本進行病毒分離。
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