采用濾膜法進行微生物檢測是一種國際公認的微生物標準檢驗方法,其得到AOAC、美國、歐洲和日本等國家的藥典、FDA和EPA等組織的承認,廣泛應用于環(huán)境監(jiān)測、食品及飲料工業(yè)、化妝品、制藥工業(yè)品質(zhì)控制和電子工業(yè)等領域。
賽多利斯公司的濾膜法微生物檢測產(chǎn)品成功地應用于濾膜法已有20多年的歷史,實用而且方便實用,它簡化了微生物檢測程序。 濾膜法微生物檢測: 將適當孔徑的濾膜放入濾器,過濾樣品,由于濾膜的作用而將微生物保留在膜的表面上。
樣品中微生物生長抑制劑可在過濾后用無菌水沖洗濾器而除去。然后,將濾膜放在培養(yǎng)基上培養(yǎng),營養(yǎng)物和代謝物通過濾膜的微孔進行交換,在濾膜表面上培養(yǎng)出的菌落可以計數(shù),并和樣品量相關。
濾膜法的優(yōu)點: - 與直接法比較,可以檢測大量的樣品 - 濃縮效應使微生物檢測的準確度提高 - 帶有菌落的濾膜,可作為檢測的永久記錄存檔 - 可見的菌落和樣品量直接對應,得出定量結果 操作具體一點就是:薄膜過濾法檢測,一個樣過濾一份,就是200ml的純化水通過濾膜,將該濾膜浸泡在滅菌好的l生理鹽水中,再接種到平皿中,制成10級、100級、1000級稀釋倍數(shù)的細菌、霉菌和酵母菌稀釋培養(yǎng)皿,即可。
在實際工作中,環(huán)境監(jiān)測可分為兩類。
一是污染源監(jiān)測,即對污染物排放情況進行監(jiān)測。一般是在污染物排出口,定期、定點采集樣品,分析、測定不同形態(tài)有害物質(zhì)的濃度、排放量以及時空分布規(guī)律。
二是環(huán)境監(jiān)測,也就是對環(huán)境中的污染物質(zhì)及其變化規(guī)律、環(huán)境影響進行分析、監(jiān)視,明確其數(shù)值、范圍、污染程度,通過綜合分析描述環(huán)境質(zhì)量狀況和發(fā)展趨勢。 按照環(huán)境要素的不同,環(huán)境監(jiān)測分為大氣污染監(jiān)測、水體污染監(jiān)測、土壤污染監(jiān)測、生物污染監(jiān)測等;根據(jù)污染物的性質(zhì)又可分為化學毒物監(jiān)測、熱污染監(jiān)測、噪聲污染監(jiān)測、放射性污染監(jiān)測等。
大氣污染監(jiān)測常用的監(jiān)測項目主要包括氣象參數(shù)和總懸浮顆粒物(TSP)、降塵、一氧化碳(CO)、二氧化硫(SO2)、碳氫化合物(HC)、氮氧化物(NOx)、臭氧(O3)等;地表水水質(zhì)監(jiān)測的項目一般包括水文、氣象參數(shù)以及溫度、酸堿度(pH)、懸浮固體(SS)、溶解氧(DO)、生物耗氧量(BOD)、化學耗氧量(COD)、某些毒物等。 環(huán)境監(jiān)測是一項技術含量很高的工作,必須由專業(yè)人員遵照國家和國際上規(guī)定的監(jiān)測方法和標準來進行,監(jiān)測結果要編制成專業(yè)文件。
對監(jiān)測過程要進行全面的質(zhì)量控制,保證數(shù)據(jù)的可靠性 環(huán)境標準是對某些環(huán)境要素所作。
生化需氧量()簡稱BOD。
是表示水中有機物等需氧污染物質(zhì)含量的一項綜合指標。它說明水中有機物處于微生物的生化作用進行氧化分解,使之無機化或氣體化時所消耗水中溶解氧的總數(shù)量,其單位以ppm(毫克/升)表示。
BOD一般指的是微生物可降解的有機物的量,即廢水中可降解有機物的量。BOD的測定方法包括:1.標準稀釋法這種方法是最經(jīng)典的也是最常用的方法。
簡單的說,就是測定在20±1℃溫度下培養(yǎng)五天前后溶液中的溶氧量的差值。求出來的BOD值稱為“五日生化需氧量(BOD5)”。
2.生物傳感器法其原理是以一定的流量使水樣及空氣進入流通量池中與微生物傳感器接觸,水樣中溶解性可升華降解的有機物受菌膜的擴散速度達到恒定時,擴散到氧電極表面上的氧質(zhì)量也達到恒定并且產(chǎn)生一恒定電流,由于該電流與水樣中可生化降解的有機物的差值與氧的減少量有定量關系,據(jù)此可算出水樣的生化需氧量。通常用BOD5標準樣品對比,以換算出水樣的BOD5的值。
3.活性污泥曝氣降解法控制溫度為30℃-35℃,利用活性污泥強制曝氣降解樣品2小時,經(jīng)重鉻酸鉀消解生物降解后的樣品,測定生物降解前后的化學計量需氧量,其差值即為BOD。根據(jù)與標準方法的對比實驗結果,可換算成為BOD5值。
4.測壓法在密閉的培養(yǎng)瓶中,水樣中溶解氧被微生物消耗,微生物因呼吸作用產(chǎn)生與耗氧量相當?shù)腃O2,當CO2被吸收后使密閉系統(tǒng)的壓力降低,根據(jù)壓力測得的壓降可求出水樣的BOD值。
藥動學重要參數(shù)及意義:
1、消除半衰期:血藥濃度下降一半所需的時間。是決定給藥間隔時間的重要參數(shù)之一。
2、生物利用度:藥物吸收速度與程度的一種量度??伤帟r曲線下面積AUC計算,F(xiàn)=口服AUC/注射AUC。
3、表觀分布容積Vd :是指血藥濃度與體內(nèi)藥物量間的一個比值,Vd=A/C=體內(nèi)藥量/血藥濃度??煞从乘幬锓植嫉膹V泛程度或藥物與組織結合的程度。
4、藥-時曲線下面積AUC 代表一次用藥后的吸收總量,反映藥物的吸收程度。
1.方法:檢測細菌總數(shù)、大腸菌群、真菌和HBsAg 四項指
標。
2. 細菌菌落總數(shù):用浸有生理鹽水的棉拭子在5 x 5cm2滅
菌規(guī)格板內(nèi)涂抹受檢物品表面10 次,將棉拭子放入10ml 滅菌
生理鹽水中。按部頒《消毒技術規(guī)范》(1991)方法檢驗。
3.大腸桿菌:按上法采樣將棉拭子放入膽鹽乳糖管中。按
衛(wèi)生部《消毒技術規(guī)范》(1991)方法檢驗,記錄陽性、陰性數(shù)。
4 真菌:按(2)方法采樣,將樣品按1:10稀釋,用H-92
微型混合器震蕩30min,使真菌孢子充分散開,接種于馬鈴薯
葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基,28°C培養(yǎng)7d,記錄平皿陽性、陰性數(shù)。
5 HBsAg:用蘸有1%血清磷酸鹽緩沖液(0.01M,pH 7.2-7.4)棉拭子在5 x 5cm2規(guī)格板內(nèi)涂抹物體表面10次,浸入1ml
磷酸鹽緩沖液中。按部頒《消毒技術規(guī)范》(1991)方法檢驗.
注:王云峰,王有森,白竟玉,等.消毒技術規(guī)范〔M〕. 北京:衛(wèi)生部,1991:100-113
目前的話,一般是血液和唾液兩種采樣方式。我之前做過的盛景基因公司他們是通過唾液采樣,他們的流程如下:
【采集方法】
1.在采集唾液樣本前30分鐘,請用飲用水將口腔內(nèi)的雜物洗漱干凈。
2.用舌尖抵住上顎或下顎齒根以富集唾液,向采集漏斗中輕輕吐入唾液,直至液體唾液(非氣泡)達到刻度線高度。
3.手持唾液采集管,令其處于直立。并用另一只手協(xié)助將采集漏斗旋下。
4.從采集管底部取下采集管管蓋,并用管蓋將采集管擰緊。
5.上下顛倒采集管5次,使唾液與唾液保存液充分混勻。丟棄使用過的采集漏斗。
【注意事項】
1.采樣前30分鐘,請勿飲食、飲水、吸煙或嚼口香糖等。
2.多數(shù)人按照上述步驟采集唾液樣本需要2~5分鐘的時間。
3.開始采集唾液之前,請放松臉頰,并用手指輕輕按摩臉頰15~30秒以產(chǎn)生唾液。
4.確認唾液樣本采集管的外包裝完好,檢查唾液保存管,確認無漏液。
5.室溫儲存條件下,本產(chǎn)品收集的唾液樣本可穩(wěn)定保存12個月,保存期限內(nèi),可以分離高質(zhì)量的高分子量DNA片段。鑒于樣本存在個體差異,不同樣本的具體保存期限有所波動。
6.本產(chǎn)品為一次性使用,禁止二次使用,禁止不同個體使用同一個唾液采集管。
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