ms培養(yǎng)基配置([高中生物]MS培養(yǎng)基是什么??它的成分是??用于做什么實驗的?)

1.[高中生物]MS培養(yǎng)基是什么??它的成分是??用于做什么實驗的?

MS培養(yǎng)基是Murashige和Skoog于1962年

為煙草細胞培養(yǎng)設(shè)計的，其特點是無機

鹽和離子濃度較高，是較穩(wěn)定的離子平

衡溶液，它的硝酸鹽含量高，其養(yǎng)分的

數(shù)量和比例合適，能滿足植物細胞的營

養(yǎng)和生理需要，因而適用范圍比較廣，多

數(shù)植物組織培養(yǎng)快速繁殖用它作為培養(yǎng)

基的基本培養(yǎng)基。

注意事項：

1.母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是：每

種母液中的幾種成分稱量完畢后，分別

用少量的蒸餾水徹底溶解，然后再將它

們混溶，最后定容到1

2.母液Ⅲ的配制方法是：將稱好的

FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分別

放到450

mL蒸餾水中，邊加熱邊不斷攪

拌使它們?nèi)芙猓缓髮煞N溶液混合，

并將pH調(diào)至5.5，最后定容到1

L，保存

在棕色玻璃瓶中。

3.MS培養(yǎng)基中還需要加入2,4-二氯苯

氧乙酸（2,4-D）、萘乙酸（NAA）、6

芐基

嘌呤（6BA）等植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)，并且分

別配成母液（0

1

mg/mL）。其配制方法

是：分別稱取這3種物質(zhì)各10

mg，將

2,4-D和NAA用少量（1

mL）無水乙醇預(yù)

溶，將6BA用少量（1

mL）的物質(zhì)的量濃

度為0.1

mol/L的NaOH溶液溶解，溶解過

程需要水浴加熱，最后分別定容至100

mL，即得質(zhì)量濃度為0

1

mg/mL的母液。

4.組織培養(yǎng)是否能夠獲得成功，主要取

決于對培養(yǎng)基的選擇。不同的培養(yǎng)基具

有不同的特點，也就適合于不同的植物

種類和接種材料。在開展組織培養(yǎng)項目

時，首先要對各種培養(yǎng)基進行了解和分

析，以便能從中選擇合適的使用。組培

用的培養(yǎng)基一般包括基礎(chǔ)培養(yǎng)基和激

素，但是植物激素的種類和數(shù)量，隨著

不同培養(yǎng)階段和不同材料有變化，因此

各培養(yǎng)基配方中均不列入植物激素。

2.MS培養(yǎng)基配方的注意事項

配制培養(yǎng)液時應(yīng)注意：

①在使用提前配制的母液時，應(yīng)在量取各種母液之前，輕輕搖動盛放母液的瓶子，如果發(fā)現(xiàn)瓶中有沉淀、懸浮物或被微生物污染，應(yīng)立即淘汰這種母液，重新進行配制；為防止母液被微生物污染，有機母液放在冰箱里4℃保存；

②用量筒或移液管量取培養(yǎng)基母液之前，必須用所量取的母液將量筒或移液管潤洗2次；

③量取母液時，最好將各種母液按將要量取的順序?qū)懺诩埳?，量?種，劃掉1種，以免出錯。溶化瓊脂 用粗天平分別稱取瓊脂9 g、蔗糖30 g，放入1 000 mL的搪瓷量杯中，再加入蒸餾水750 mL，用電爐加熱，邊加熱邊用玻璃棒攪拌，直到液體呈半透明狀。然后再將配好的混合培養(yǎng)液加入到煮沸的瓊脂中，最后加蒸餾水定容至1 000 mL，攪拌均勻。

需要注意的是，在加熱瓊脂，制備培養(yǎng)基的過程中，操作者千萬不能離開，否則沸騰的瓊脂外溢，就需要重新稱量、制備。此外，如果沒有搪瓷量杯，可用大燒杯代替。但要注意大燒杯底的外表面不能沾水，否則加熱時燒杯容易炸裂，使溶液外溢，造成燙傷。調(diào)pH 用滴管吸取物質(zhì)的量濃度為1 mol/L的NaOH溶液，逐滴滴入溶化的培養(yǎng)基中，邊滴邊攪拌，并隨時用pH試紙測培養(yǎng)基的pH，一直調(diào)到培養(yǎng)基的pH為6(5.8~6.5)左右為止。培養(yǎng)基的分裝 溶化的培養(yǎng)基應(yīng)該趁熱分裝。分裝時，先將培養(yǎng)基倒入燒杯中，然后將燒杯中的培養(yǎng)基倒入錐形瓶（50 mL或100 mL）中。注意不要讓培養(yǎng)基沾到瓶口和瓶壁上。錐形瓶中培養(yǎng)基的量約為錐形瓶容量的1/5~1/4。每1 000 mL培養(yǎng)基，可分裝25~30瓶。培養(yǎng)基分裝完畢后，應(yīng)及時封蓋瓶口。用2塊硫酸紙（每塊大小約為9 cm*9 cm）中間夾1層薄牛皮紙封蓋瓶口，并用線繩捆扎。最后在錐形瓶外壁貼上標簽。

3.MS培養(yǎng)基配方的注意事項

去百度文庫，查看完整內(nèi)容>內(nèi)容來自用戶：MBBMMS培養(yǎng)基母液的配制：20*MS大量元素（1 L）:38 g KNO3,33 g NH4NO3,8.8 g CaCl2·2H2O,7.4 g MgSO4·7H2O,3.4 g KH2PO4。

200*MS微量元素（1 L）:0.166 g KI,1.24 g H3BO3,4.46 g MnSO4·4H2O,1.72 g ZnSO4·7H2O,0.05 g Na2MoO4·2H2O,0.005 g CuSO4·5H2O,0.005 g CoCl2·6H2O。200*MS維生素和氨基酸（1 L）:20 g肌醇，0.1 g煙酸，0.1 g鹽酸吡哆醇（VB6）,0.02 g鹽酸硫胺素（thiamine hydrochloride, VB1）,0.4 g甘氨酸。

200*MS鐵鹽（1 L）:5.56 g FeSO4·7H2O,7.46 g Na2EDTA·2H2O，先溶于500 mL ddH2O，加熱，調(diào)pH至5.5，定容至1 L。注意：配制大量元素母液時，為避免產(chǎn)生沉淀，要用純度高的重蒸餾水溶解，藥品采用分析純。

化學(xué)藥品先以少量重蒸餾水充分溶解后然后混合，混合時需注意邊攪拌邊混合。CaCl2·2H2O要在最后單獨加入，在溶解CaCl2·2H2O時，蒸餾水需加熱沸騰，除去水中的CO2，以防沉淀。

配制鐵鹽母液時，F(xiàn)eSO4和Na2-EDTA應(yīng)分別加熱溶解后混合，并置于磁力攪拌器上不斷攪拌至溶液呈金黃色（約加熱20-30 min），調(diào)pH值至5 .5，室溫放置冷卻后，再冷藏。使用上述配好的母液，按照稀釋倍數(shù)，配制基礎(chǔ)MS培養(yǎng)液：1*MS大量元素，1*MS微量元素，1*MS維生素和氨基酸，1*MS鐵鹽，蔗糖30 g/L，定容后調(diào)節(jié)pH至5.8，高溫高壓滅菌。

固體培養(yǎng)基含植物凝膠3.5 g/L或瓊脂9 g/L。另MS基本培養(yǎng)基可用Murashige and Skoog Basal Salt Mixture。

4.配制ms培養(yǎng)基母液時應(yīng)注意哪些問題

剛剛復(fù)習(xí)了這里，借花獻佛~~ 培養(yǎng)基配制應(yīng)遵循的原則 1、根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需要配制不同的培養(yǎng)基。

2、注意各種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度及合適配比，保持合適滲透壓 。 3、將培養(yǎng)基的 pH 控制在適宜的范圍之內(nèi)，以利于不同類型微生物的生長繁殖或代謝產(chǎn)物的積累。

4、經(jīng)濟節(jié)約的原則。在所選培養(yǎng)基成分能滿足微生物培養(yǎng)要求的前提下，盡可能選用價格低廉，資源豐富的材料作培養(yǎng)基成分。

5、控制氧化還原電位。對厭氧的微生物尤其重要。

6、培養(yǎng)基應(yīng)無菌。故在培養(yǎng)基配制后應(yīng)徹底殺死培養(yǎng)基中的雜菌 。

5.配制ms培養(yǎng)基母液時應(yīng)注意哪些問題

剛剛復(fù)習(xí)了這里，借花獻佛~~ 培養(yǎng)基配制應(yīng)遵循的原則 1、根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需要配制不同的培養(yǎng)基。

2、注意各種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度及合適配比，保持合適滲透壓 。 3、將培養(yǎng)基的 pH 控制在適宜的范圍之內(nèi)，以利于不同類型微生物的生長繁殖或代謝產(chǎn)物的積累。

4、經(jīng)濟節(jié)約的原則。在所選培養(yǎng)基成分能滿足微生物培養(yǎng)要求的前提下，盡可能選用價格低廉，資源豐富的材料作培養(yǎng)基成分。

5、控制氧化還原電位。對厭氧的微生物尤其重要。

6、培養(yǎng)基應(yīng)無菌。故在培養(yǎng)基配制后應(yīng)徹底殺死培養(yǎng)基中的雜菌 。

6.MS培養(yǎng)基配方的配制步驟

原發(fā)布者：鯊魚鮮生

MS培養(yǎng)基母液的配制：20*MS大量元素（1L）:38gKNO3,33gNH4NO3,8.8gCaCl2·2H2O,7.4gMgSO4·7H2O,3.4gKH2PO4。200*MS微量元素（1L）:0.166gKI,1.24gH3BO3,4.46gMnSO4·4H2O,1.72gZnSO4·7H2O,0.05gNa2MoO4·2H2O,0.005gCuSO4·5H2O,0.005gCoCl2·6H2O。200*MS維生素和氨基酸（1L）:20g肌醇，0.1g煙酸，0.1g鹽酸吡哆醇（VB6）,0.02g鹽酸硫胺素（thiaminehydrochloride,VB1）,0.4g甘氨酸。200*MS鐵鹽（1L）:5.56gFeSO4·7H2O,7.46gNa2EDTA·2H2O，先溶于500mLddH2O，加熱，調(diào)pH至5.5，定容至1L。注意：配制大量元素母液時，為避免產(chǎn)生沉淀，要用純度高的重蒸餾水溶解，藥品采用分析純?；瘜W(xué)藥品先以少量重蒸餾水充分溶解后然后混合，混合時需注意邊攪拌邊混合。CaCl2·2H2O要在最后單獨加入，在溶解CaCl2·2H2O時，蒸餾水需加熱沸騰，除去水中的CO2，以防沉淀。配制鐵鹽母液時，F(xiàn)eSO4和Na2-EDTA應(yīng)分別加熱溶解后混合，并置于磁力攪拌器上不斷攪拌至溶液呈金黃色（約加熱20-30min），調(diào)pH值至5.5，室溫放置冷卻后，再冷藏。使用上述配好的母液，按照稀釋倍數(shù)，配制基礎(chǔ)MS培養(yǎng)液：1*MS大量元素，1*MS微量元素，1*MS維生素和氨基酸，1*MS鐵鹽，蔗糖30g/L，定容后調(diào)節(jié)pH至5.8，高溫高壓滅菌。固體培養(yǎng)基含植物凝膠3.5g/L或瓊脂9g/L。另MS基本培養(yǎng)基可用(Sigma-Aldrich)快速配制。播種方法：

7.MS培養(yǎng)基的配制與滅菌

植物組織培養(yǎng)中常用的一種培養(yǎng)基是MS培養(yǎng)基。

MS培養(yǎng)基的配制包括以下步驟。 培養(yǎng)基母液的配制和保存 MS培養(yǎng)基含有近30種營養(yǎng)成分，為了避免每次配制培養(yǎng)基都要對這幾十種成分進行稱量，可將培養(yǎng)基中的各種成分，按原量的20倍或200倍分別稱量，配成濃縮液，這種濃縮液叫做培養(yǎng)基母液。

這樣每次使用時，取其總量的1/20(50 mL)或1/200(5 mL)，加水稀釋，制成培養(yǎng)液?，F(xiàn)將制備培養(yǎng)基母液所需的各類物質(zhì)的量列出，供配制時使用。

大量元素（母液Ⅰ） mg/L NH4NO3 33 000 KNO3 38 000 CaCl2·2H2O 8 800 MgSO4·7H2O 7 400 KH2PO4 3 400 微量元素（母液Ⅱ） KI 166 H3BO3 1 240 MnSO4·4H2O 4 460 ZnSO4·7H2O 1 720 Na2MoO4·2H2O 50 CuSO4·5H2O 5 CoCl2·6H2O 5 鐵鹽（母液Ⅲ） FeSO4·7H2O 5 560 Na2-EDTA·2H2O 7 460 有機成分（母液Ⅳ） ⅣA 肌醇 20 000 ⅣB 煙酸 100 鹽酸吡哆醇（維生素B6） 100 鹽酸硫胺素（維生素B1） 100 甘氨酸 400 以上各種營養(yǎng)成分的用量，除了母液Ⅰ為20倍濃縮液外，其余的均為200倍濃縮液。 上述幾種母液都要單獨配成1 L的貯備液。

其中，母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是：每種母液中的幾種成分稱量完畢后，分別用少量的蒸餾水徹底溶解，然后再將它們混溶，最后定容到1 L。 母液Ⅲ的配制方法是：將稱好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分別放到450 mL蒸餾水中，邊加熱邊不斷攪拌使它們?nèi)芙猓缓髮煞N溶液混合，并將pH調(diào)至55，最后定容到1 L，保存在棕色玻璃瓶中。

各種母液配完后，分別用玻璃瓶貯存，并且貼上標簽，注明母液號、配制倍數(shù)、日期等，保存在冰箱的冷藏室中。 MS培養(yǎng)基中還需要加入2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D）、萘乙酸（NAA）、6芐基嘌呤（6BA）等植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)，并且分別配成母液（01 mg/mL）。

其配制方法是：分別稱取這3種物質(zhì)各10 mg，將2,4-D和NAA用少量（1 mL）無水乙醇預(yù)溶，將6BA用少量（1 mL）的物質(zhì)的量濃度為0.1 mol/L的NaOH溶液溶解，溶解過程需要水浴加熱，最后分別定容至100 mL，即得質(zhì)量濃度為01 mg/mL的母液。 配制培養(yǎng)液 用量筒或移液管從各種母液中分別取出所需的用量：母液Ⅰ為50 mL，母液Ⅱ、Ⅲ、ⅣA和ⅣB各5 mL。

再取2,4D 5 mL、NAA 1 mL，與各種母液一起放入燒杯中。 配制培養(yǎng)液時應(yīng)注意：①在使用提前配制的母液時，應(yīng)在量取各種母液之前，輕輕搖動盛放母液的瓶子，如果發(fā)現(xiàn)瓶中有沉淀、懸浮物或被微生物污染，應(yīng)立即淘汰這種母液，重新進行配制；②用量筒或移液管量取培養(yǎng)基母液之前，必須用所量取的母液將量筒或移液管潤洗2次；③量取母液時，最好將各種母液按將要量取的順序?qū)懺诩埳?，量?種，劃掉1種，以免出錯。

溶化瓊脂 用粗天平分別稱取瓊脂9 g、蒸糖30 g，放入1 000 mL的搪瓷量杯中，再加入蒸餾水750 mL，用電爐加熱，邊加熱邊用玻璃棒攪拌，直到液體呈半透明狀。然后再將配好的混合培養(yǎng)液加入到煮沸的瓊脂中，最后加蒸餾水定容至1 000 mL，攪拌均勻。

需要注意的是，在加熱瓊脂、制備培養(yǎng)基的過程中，操作者千萬不能離開，否則沸騰的瓊脂外溢，就需要重新稱量、制備。此外，如果沒有搪瓷量杯，可用大燒杯代替。

但要注意大燒杯底的外表面不能沾水，否則加熱時燒杯容易炸裂，使溶液外溢，造成燙傷。 調(diào)pH 用滴管吸取物質(zhì)的量濃度為1 mol/L的NaOH溶液，逐滴滴入溶化的培養(yǎng)基中，邊滴邊攪拌，并隨時用精密的pH試紙（54~70）測培養(yǎng)基的pH，一直到培養(yǎng)基的pH為58為止（培養(yǎng)基的pH必須嚴格控制在58）。

培養(yǎng)基的分裝 溶化的培養(yǎng)基應(yīng)該趁熱分裝。分裝時，先將培養(yǎng)基倒入燒杯中，然后將燒杯中的培養(yǎng)基倒入錐形瓶（50 mL或100 mL）中。

注意不要讓培養(yǎng)基沾到瓶口和瓶壁上。錐形瓶中培養(yǎng)基的量約為錐形瓶容量的1/5~1/4。

每1 000 mL培養(yǎng)基，可分裝25~30瓶。 培養(yǎng)基分裝完畢后，應(yīng)及時封蓋瓶口。

用2塊硫酸紙（每塊大小約為9 cm*9 cm）中間夾1層薄牛皮紙封蓋瓶口，并用線繩捆扎。最后在錐形瓶外壁貼上標簽。

高壓滅菌 培養(yǎng)基的高壓滅菌包括以下幾個步驟。 第一，碼放錐形瓶。

將裝有培養(yǎng)基的錐形瓶直立于金屬小筐中，再放入高壓蒸氣滅菌鍋內(nèi)。如果沒有金屬小筐，可以在兩層錐形瓶之間放一塊玻璃板隔開。

第二，放置其他需要滅菌的物品。將其他需要滅菌的物品也放入高壓蒸氣滅菌鍋內(nèi)，如裝有蒸餾水的錐形瓶、帶螺口蓋的玻璃瓶、燒杯、廣口瓶（以上物品都要用牛皮紙封口），用牛皮紙包裹的培養(yǎng)皿、剪刀、解剖刀、鑷子、濾紙、鉛筆等。

第三，滅菌。待需要滅菌的物品碼放完畢，蓋上鍋蓋。

在98 kPa、121.3 ℃下，滅菌20 min。 滅菌后取出錐形瓶，讓其中的培養(yǎng)基自然冷卻凝固。

最好放置1 d后再使用。

8.MS的配制過程及要點

MS培養(yǎng)基的配制

植物組織培養(yǎng)中常用的一種培養(yǎng)基是MS培養(yǎng)基。MS培養(yǎng)基的配制包括以下步驟。

培養(yǎng)基母液的配制和保存 MS培養(yǎng)基含有近30種營養(yǎng)成分，為了避免每次配制培養(yǎng)基都要對這幾十種成分進行稱量，可將培養(yǎng)基中的各種成分，按原量的20倍或200倍分別稱量，配成濃縮液，這種濃縮液叫做培養(yǎng)基母液。這樣每次使用時，取其總量的1/20(50 mL)或1/200(5 mL)，加水稀釋，制成培養(yǎng)液。現(xiàn)將制備培養(yǎng)基母液所需的各類物質(zhì)的量列出，供配制時使用。

大量元素（母液Ⅰ） mg/L

NH4NO3 33 000

KNO3 38 000

CaCl2·2H2O 8 800

MgSO4·7H2O 7 400

KH2PO4 3 400

微量元素（母液Ⅱ）

KI 166

H3BO3 1 240

MnSO4·4H2O 4 460

ZnSO4·7H2O 1 720

Na2MoO4·2H2O 50

CuSO4·5H2O 5

CoCl2·6H2O 5

鐵鹽（母液Ⅲ）

FeSO4·7H2O 5 560

Na2-EDTA·2H2O 7 460

有機成分（母液Ⅳ）

ⅣA

肌醇 20 000

ⅣB

煙酸 100

鹽酸吡哆醇（維生素B6） 100

鹽酸硫胺素（維生素B1） 100

甘氨酸 400

以上各種營養(yǎng)成分的用量，除了母液Ⅰ為20倍濃縮液外，其余的均為200倍濃縮液。

培養(yǎng)基母液的配制和保存 MS培養(yǎng)基含有近30種營養(yǎng)成分，為了避免每次配制培養(yǎng)基都要對這幾十種成分進行稱量，可將培養(yǎng)基中的各種成分，按原量的20倍或200倍分別稱量，配成濃縮液，這種濃縮液叫做培養(yǎng)基母液。這樣每次使用時，取其總量的1/20(50 mL)或1/200(5 mL)，加水稀釋，制成培養(yǎng)液?，F(xiàn)將制備培養(yǎng)基母液所需的各類物質(zhì)的量列出，供配制時使用。

大量元素（母液Ⅰ） mg/L

NH4NO3 33 000

KNO3 38 000

CaCl2·2H2O 8 800

MgSO4·7H2O 7 400

KH2PO4 3 400

微量元素（母液Ⅱ）

KI 166

H3BO3 1 240

MnSO4·4H2O 4 460

ZnSO4·7H2O 1 720

Na2MoO4·2H2O 50

CuSO4·5H2O 5

CoCl2·6H2O 5

鐵鹽（母液Ⅲ）

FeSO4·7H2O 5 560

Na2-EDTA·2H2O 7 460

有機成分（母液Ⅳ）

ⅣA

肌醇 20 000

ⅣB

煙酸 100

鹽酸吡哆醇（維生素B6） 100

鹽酸硫胺素（維生素B1） 100

甘氨酸 400

以上各種營養(yǎng)成分的用量，除了母液Ⅰ為20倍濃縮液外，其余的均為200倍濃縮液。

上述幾種母液都要單獨配成1 L的貯備液。其中，母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是：每種母液中的幾種成分稱量完畢后，分別用少量的蒸餾水徹底溶解，然后再將它們混溶，最后定容到1 L。

母液Ⅲ的配制方法是：將稱好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分別放到450 mL蒸餾水中，邊加熱邊不斷攪拌使它們?nèi)芙猓缓髮煞N溶液混合，并將pH調(diào)至5