1、要,因?yàn)楹媚?2、要緩沖液 3、一方面是好倒出來,另一方面是穩(wěn)定細(xì)胞破碎后的某些物質(zhì)或者便于分離。
(如緩沖液里面加有Ca2+,鈣離子能夠促進(jìn)質(zhì)膜碎片的聚集)。至于用什么要看你的組織是什么 4、緩沖液在磨樣的時(shí)候只加一小部分,其他的就是在磨完后沖洗勻漿器的 如, 最常用的勻漿介質(zhì)為等滲的蔗糖(0.25mol/L)和氯化鉀(0.154mol/L)。
蔗糖為經(jīng)典亞細(xì)胞組分分離研究所選用,而氯化鉀更適合外源化學(xué)物代謝酶的研究,如它可更有效除去微粒體制備物中的血紅蛋白,減少光譜測(cè)定的干擾。勻漿介質(zhì)在使用前應(yīng)將pH調(diào)至7.4左右。
勻漿緩沖液可含有5~50mmol/L的Tris或Hepes。 大多數(shù)研究中常用的勻漿緩沖液為含0.154mol/L KCl的50mmol/L Tris?HCI緩沖液,pH7.4。
此緩沖液在4℃條件下,至少貯存12周不變質(zhì)。
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